透射电子显微镜,简称透射电镜,是以波长很短的电子束作照明源,用电磁透镜聚焦成像的一种高分辨本领、高放大倍数的电子光学仪器。透射电镜同时具有两大功能:物相分析和组织分析。物相分析是利用电子和晶体物质作用可以发生衍射的特点,获得物相的衍射花样;而组织分析是利用电子波遵循阿贝成像原理,可以通过干涉成像的特点,获得各种衬度图像。透射电镜主要由3个基本部分构成:电子光学系统、真空控制系统和电源系统。透射电镜用聚焦电子束作为照明源,使用对电子束透明的薄膜试样(101~103 nm),以透射电子为成像信号。
扫描电子显微镜不用电磁透镜放大成像,而是以类似电视摄影显像的方式,利用细聚焦电子束在样品表面扫描时激发出来的各种物理信号来调制成像的。扫描电镜现在在数量和普及程度上均已超过了透射电镜。扫描电镜主要由3个基本部分构成:电子光学系统(镜筒)、信号收集和图像显示系统和真空控制系统。
扫描电镜的工作原理是用一束极细的电子束扫描样品,在样品表面激发出次级电子,次级电子的多少与电子束入射角有关,也就是说与样品的表面结构有关,次级电子由探测体收集,并在那里被闪烁器转变为光信号,再经光电倍增管和放大器转变为电信号来控制荧光屏上电子束的强度,显示出与电子束同步的扫描图像。图像为立体形象,反映了标本的表面结构。为了使标本表面发射出次级电子,标本在固定、脱水后,要喷涂上一层重金属微粒,重金属在电子束的轰击下发出次级电子信号。
透射电镜具有高分辨率、高性能优势,因此可以应用于材料科学方面的成分和结构分析,也可以应用于生命科学方面进行生化物质定位,为科研和实际生产提供可靠的数据来源。应用主要有以下几点:(1)用于气溶单颗粒的研究;(2)用于C/C复合材料的研究;(3)用于纳米粉体的研究;(4)用于铁材料的电畴观察。另外,还是物理学和生物学相关的许多科学领域的重要分析方法之一,如癌症研究、病毒学、材料科学、纳米技术以及半导体研究等。
扫描电镜是一种高分辨率的电镜,可以直接观察样品表面,图像富有立体感,真实感。而且它除了能显示一般试样表面的形貌外,还能将试样微区范围内的化学元素与光、电、磁等性质的差异以二维图像形式显示出来,并可用照相方式拍摄图像。另外,扫描电镜分辨本领高,观察试样的景深大,可直接观察试样表面起伏较大的粗糙结构。 扫描电子显微镜是一种有效的理化分析工具,通过它可进行各种形式的图像观察、元素分析、晶体结构分析,三维形貌的观察和分析,可以观察纳米材料、进口材料断口的分析,直接观察大试样的原始表面,观察厚试样,观察试样的各个区域的细节。在观察形貌的同时,进行微区的成分分析,还可以观察生物试样,进行动态观察。
1、取材时要迅速,组织从活体取下后应在最短时间内投入到固定液中;
2、样本体积不能过大,以免影响固定剂的渗透;
3、电镜标本制作中要注意室内的温湿度,湿度不能超过40%;
4、电镜标本制作所用液体,需4℃冷藏。